超濾離心管超濾率受影響因素
更新時間：2020-01-17 點(diǎn)擊次數(shù)：1748次
超濾常用于分離溶液中極其微小的顆粒和不溶分子。終目的是較大限度的回收目標(biāo)溶質(zhì)。雖然分離效果受到包括化學(xué)性質(zhì)、電荷等多種因素影響，這種方法主要還是以分子大小為基本的考慮。超濾膜截留1-1000kDa（MW）的分子，鹽和水等小分子會透過，因此在大分子樣品處理中得到了廣泛應(yīng)用。
超濾離心管就是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子，比如離一些樣品，分離出上清沉淀。蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管。目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標(biāo)體積而定?？芍貜?fù)使用，使用一次就扔掉太浪費(fèi)。
離心超濾管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分，內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜，當(dāng)高速離心時，分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了，分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中)，就是超濾的原理。
超濾離心管超濾率受影響因素
超濾過程中需要在速率和回收率之間平衡以期獲得較好好的效果。濾膜的通量的定義是流量除以面積，使用高 NMWL濾膜可以增加通量，但同時會降低回收率。選擇膜和裝置時需要同時考慮截留分子量和通量。而參與影響通量的因素很多，包括：壓力：較為稀釋的蛋白溶液或膠體懸液進(jìn)行超濾時，流量隨著跨膜壓力（TMP）的增大而增加。正壓條件下操作，如 Stirred Cell 攪拌式超濾杯，這種因素影響較為明顯。如果極化影響顯著，通量會達(dá)到一個平臺，甚至可能隨著壓力的增加而降低。
濃度：當(dāng)需要截留的樣品濃度很低時，通量通常不受濃度影響。操作過程中，隨著溶質(zhì)濃度的升高，增加的粘滯性和極化將導(dǎo)致通量降低。溫度：通常增加操作時的溫度可以提高超濾效率。每增加1℃蛋白擴(kuò)散率增加3-3.5%，同時溶液粘度降低。實(shí)踐中一般是以樣品和設(shè)備能耐 受的高溫度來操作。pH：改換溶液和/或pH常常改變分子結(jié)構(gòu)，蛋白尤其如此。在蛋白的pI值蛋白會沉淀，產(chǎn)生堵塞和得率損失。污垢：溶液中除了目的分子造成的濃差極化，還有其它小顆粒和分子會在膜上富集和沉淀，逐漸堆積在膜孔上或膜孔結(jié)構(gòu)中，形成結(jié)晶和沉淀。
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